1. Bioquímica: Determinación de Proteínas y Glúcidos

El Método de Biuret

El Método de Biuret sirve para calcular cuánta proteína hay en una muestra. Funciona de la siguiente manera: cuando mezclamos la proteína con cobre en un medio alcalino, el cobre se une a los enlaces peptídicos de la proteína y el líquido se tiñe de color violeta. La clave es que cuanto más oscuro sea ese violeta (mayor absorbancia), más cantidad de proteína tiene la muestra.

Para cuantificar los resultados, se utiliza la ecuación de la recta de calibrado:

• y = ax + b
• y: Absorbancia.
• x: Concentración de proteína.
• a: Pendiente de la recta.
• b: Valor de la absorbancia cuando no hay proteína (suele ser 0).

Identificación de Azúcares y Almidón

Resultados con Fehling (Detecta azúcares reductores):

• Positivo (Rojo-ladrillo): Glucosa, maltosa y lactosa.
• Negativo (Azul): Sacarosa y almidón.

Resultados con Lugol (Detecta almidón):

• Positivo (Azul-violeta): Almidón.
• Negativo (Ámbar/Amarillo): Glucosa.

2. Hematología: Tipos de Células y Técnica de Frotis

Células de la Sangre

En nuestra sangre se encuentran principalmente dos tipos de células:

• Eritrocitos: Glóbulos rojos.
• Leucocitos: Glóbulos blancos.

¿Cómo hacer una muestra de sangre?

1. Ponemos una gota de sangre en el portaobjetos.
2. Con otro portaobjetos, deslizamos para extenderla (realizar el frotis) y dejamos secar.
3. Se cubre el frotis con metanol durante 5 minutos para fijar la muestra.
4. Se aplica el colorante y se deja actuar por 20 minutos.
5. Se lava con agua destilada y se procede a observar en el microscopio.

3. El Ciclo Celular y la Mitosis

Fases de la Mitosis

• Profase: Los cromosomas se condensan y se hacen visibles.
• Metafase: Los cromosomas se alinean en el centro o plano ecuatorial de la célula.
• Anafase: Las cromátidas hermanas se separan y se desplazan hacia los polos opuestos.
• Telofase: Se forman nuevos núcleos y los cromosomas se descondensan.

Estudio de la Mitosis en el Ápice de la Raíz de Ajo

1. ¿Por qué se utiliza el ápice de la raíz de ajo? Porque contiene meristemos, que son tejidos con una alta actividad mitótica.
2. ¿Qué función cumple el HCl 1N? Ayuda a romper la pared celular y ablandar los tejidos, facilitando el aplastamiento y la separación de las células.
3. ¿Qué fase se identifica por los cromosomas alineados en el ecuador? La metafase.
4. ¿Cuál es el propósito del aplastamiento (squash) con el pulgar? Dispersar las células en una capa muy fina para permitir la observación de cromosomas individuales.
5. ¿Qué fase mitótica se reconoce por la separación de cromátidas? La anafase.

4. Microscopía Óptica: Fundamentos y Uso Correcto

• Uso del tornillo macrométrico: Es incorrecto usarlo con el objetivo de 40x porque puede hacer que el objetivo choque con el portaobjetos, rompiéndolo o dañando la lente. Con 40x y 100x solo se debe usar el micrométrico.
• El condensador: Concentra y dirige el haz de luz sobre la preparación, aumentando la nitidez y la resolución.
• Aceite de inmersión: El objetivo de 100x lo necesita para igualar el índice de refracción entre el vidrio y la lente, evitando la pérdida de luz y aumentando el poder de resolución.
• Factores limitantes: El poder de resolución está limitado por la longitud de onda de la luz y la apertura numérica del objetivo.
• Apertura del diafragma: Si se abre demasiado, entra más luz pero disminuye el contraste, dificultando la visión de detalles finos.

5. Botánica: Organelos, Histología y Fisiología Vegetal

Organelos y Estructuras Celulares

• Cloroplastos: Contienen clorofila, que capta la luz y permite realizar la fotosíntesis.
• Cromoplastos: Aparecen rojos o naranjas (como en el tomate maduro) por la presencia de carotenoides, pigmentos no fotosintéticos.
• Amiloplastos: Almacenan almidón. Se demuestra su presencia con Lugol (reacción azul-violácea). Internamente presentan bandas concéntricas y un hilio.
• Cristales de oxalato cálcico: Se encuentran en células del catáfilo de la cebolla y se forman por la precipitación de ácido oxálico con calcio.

Fisiología: Turgencia y Plasmólisis

1. Agua destilada: Se usa porque está libre de solutos (medio hipotónico), lo que favorece la entrada de agua a la célula por ósmosis.
2. La vacuola en plasmólisis: Reduce su volumen al perder agua y el citoplasma se retrae de la pared celular.
3. Reversibilidad: La plasmólisis es reversible si la membrana plasmática no se rompe; al volver a un medio hipotónico, la célula recupera la turgencia.
4. Concentración citoplasmática: En la cebolla, suele estar entre 0,3–0,4 M.
5. Sostén: La presión de turgencia contra la pared celular permite a las plantas mantenerse firmes sin esqueleto.

Histología Vegetal y Estomas

Función de los estomas:

• Permiten la entrada de CO2 para la fotosíntesis y la salida de O2.
• Controlan la pérdida de agua (transpiración) abriendo o cerrando el poro.
• Ayudan a refrescar la planta mediante la evaporación de agua.

Diferencias en el parénquima:

• En empalizada: Células alargadas, con muchos cloroplastos; realizan fotosíntesis intensa.
• Lagunar: Células irregulares con espacios aéreos para el intercambio gaseoso.

Tinción diferencial en el tallo:

• Xilema: Se tiñe de verde (verde yodo/malaquita).
• Floema y parénquimas: Se tiñen de rojo (Rojo Congo).

Otras estructuras:

• Tricomas: Pelos epidérmicos para protección, regulación térmica o defensa.
• Cistolitos: Acumulaciones de carbonato cálcico dentro de litocistos (comunes en hojas de Ficus).